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培养基适用性检查

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2015版中国药典第四部通则9203中关于培养基的质量控制有一段话“实验室应制定试验用培养基的质量控制程序,确保所用培养基质量符合相关检查的需要。”那么培养基的质量主要通过什么方式进行验收的呢?——培养基适应性(促生长)试验。

培养基适应性试验的定义:是通过新进培养基与合格培养基的比较,以菌落的生长状态或特征数量客观评价新进培养基是否符合使用要求。

培养基适应性操作大致如下:

1、取相应阳性菌落复苏培养后稀释成含菌量在100CFU以下待用,制备用菌悬液不可放置太久,应尽快使用。

2、按照标准或说明书溶解制备待测培养基并设置对照组,阴性对照等。(商业化的培养基干粉,溶解、灭菌和培养条件等应严格按照厂家提供的使用说明书要求进行操作。)

3、将阳性菌落均匀地涂布在琼脂平板上或直接倾倒于培养基混匀并标记,对照组参照相同方法。根据不同的阳性菌特性,涂布或划线时应轻柔均匀接种至琼脂培养基表面。(液体培养基直接接种至溶液中,应垂直避免菌落贴在试管壁上)

4、将已接中好的培养基放置在对应条件下进行培养。(培养箱的温湿度应符合对应菌种要求)。

5、菌落计数结果(平均数):待测组/对照组=0.5-2.0;菌落形态大小与对照培养基一致。(被检测液体培养基管与对照培养基管比较,试验菌应生长良好。)

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